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分享一份專業(yè)人員總結(jié)的細(xì)胞計(jì)數(shù)片的使用說明

更新時間:2021-08-12瀏覽:1342次


    細(xì)胞計(jì)數(shù)片是一種常用的細(xì)胞計(jì)數(shù)工具,醫(yī)學(xué)上常用來計(jì)數(shù)紅細(xì)胞、白細(xì)胞等而得名,也常用于計(jì)算一些細(xì)菌、真菌、酵母等微生物的數(shù)量,是一種常見的生物學(xué)工具。

 

    細(xì)胞計(jì)數(shù)片的使用說明:

    (1)充分混勻細(xì)胞,將細(xì)胞懸液滴加在兩個細(xì)胞入口處。

    (2)放在顯微鏡下靜置1-2分鐘等待細(xì)胞附著在計(jì)數(shù)板上。

    (3)按照A→B→C→D的順序?qū)γ總€細(xì)胞計(jì)數(shù)室的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)后加和。

    (關(guān)于網(wǎng)格線上的計(jì)數(shù)規(guī)則清參照下圖以及注釋(2))

    (3)細(xì)胞密度(CellDensity)通過以下公式計(jì)算得到,N是四個細(xì)胞計(jì)數(shù)室的

    (4)細(xì)胞總數(shù).

    CellDensity=(N/4)x104cells/mL

    (*)對于計(jì)數(shù)前經(jīng)過稀釋的細(xì)胞懸液,要將上式計(jì)算所得的細(xì)胞密度乘以稀釋倍數(shù)。

    注意:

    (1)為了將誤差最小化,四個計(jì)數(shù)室中的細(xì)胞均應(yīng)被計(jì)數(shù).只計(jì)數(shù)一個細(xì)胞室會增加誤差的機(jī)會,要取得更加正確的數(shù)值可以將細(xì)胞加在兩個細(xì)胞入口,并取兩個N值的平均值。

    (2)(邊界線細(xì)胞計(jì)數(shù)規(guī)則)細(xì)胞計(jì)數(shù)室上的方格邊線上,細(xì)網(wǎng)格線上的細(xì)胞應(yīng)該計(jì)數(shù),粗網(wǎng)格線上的細(xì)胞則不要計(jì)入,例如細(xì)胞計(jì)數(shù)室A。

    (3)為了提高計(jì)算細(xì)胞存活率,操作者應(yīng)該在染色后20分鐘內(nèi)完成計(jì)數(shù)(對于對染色液敏感的細(xì)胞應(yīng)在5分鐘內(nèi)完成)。細(xì)胞在染色液中時間過長會增加死細(xì)胞的數(shù)量。

    (4)氣泡在細(xì)胞計(jì)數(shù)室中偶爾會出現(xiàn),如果加樣后細(xì)胞在計(jì)數(shù)室中停留時間過長,就有可能出現(xiàn)氣泡干擾計(jì)數(shù)結(jié)果。

    (5)細(xì)胞計(jì)數(shù)室具有經(jīng)過預(yù)處理的表面,操作者不能重復(fù)使用計(jì)數(shù)板,因?yàn)樵谝淮问褂煤笥?jì)數(shù)室表面特性改變,重復(fù)用后會帶來不正確的計(jì)數(shù)結(jié)果。

    (6)為了儲存沒有用過的計(jì)數(shù)板,操作者應(yīng)將其放入密封的保險(xiǎn)袋中,不要將用過的塑料板裝進(jìn)原來的塑料袋中。

    (7)在室溫下保存,高溫會改變計(jì)數(shù)室表面的特性。

    (8)實(shí)驗(yàn)室專用,非臨床,治療,診斷用途。

 

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